发布者:Primerbank 时间:2017-09-29 浏览量:1010
实验目的:
制备细胞溶解液,将细胞溶破,为纯化细胞中表达的蛋白做准备。
实验原理:
由于cl-会使得目的蛋白从融合蛋白中洗脱,所以在制备细胞溶解液时,应避免用到含cl-的缓冲液。
实验试剂:
Profinia 细菌溶解液,E.coli B21培养液
实验步骤:
1. 取1.5ml培养液至5ml的离心管,加入300ul的溶解液,Vortex 1 min
2. 10000g,离心上述溶解物30min
3. 使用之前先在0.45um的过滤器中过滤溶解液
4. 将溶解液加载到pep树脂柱上之前应Chill溶解液